研發(fā)服務
利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧的檢測。DCFH-DA本身沒有熒光，可以自由穿過細胞膜，進入細胞內(nèi)后，可以被細胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜，從而使探針很容易被裝載到細胞內(nèi)。細胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF，檢測DCF的熒光就可以知道細胞內(nèi)活性氧的水平。
| 實驗流程
Step1：制成單細胞懸液(組織樣本)
Step2：溶血(細胞樣本無需進行此步驟)
Step3：離心去上清
Step4：調(diào)整細胞密度
Step5：加入相應的熒光探針
Step6：孵育
Step7：洗滌后離心去上清
Step8：上機檢測
| 實驗費用 ：根據(jù)客戶檢測需求以及實驗復雜程度進行報價
| 客戶注意事項
1.標本收集與保存
>> 組織樣品：新鮮組織放入液氮或-70度保存，組織不少于100mg(約綠豆大小)；
>> 培養(yǎng)細胞：通過細胞計數(shù)取不少于2000000個細胞于EP管，加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑，混勻后保存于冰箱(-70℃，避免反復凍融)；
>> 血液細胞標本：以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑，保存(-70℃可長期保存，避免反復凍融)；
>> 血清或細胞培養(yǎng)液標本：離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管，保存(以上4℃可保存15-20天，-70℃可長期保存，避免反復凍融)。
2.樣本運輸：可選以下任何的一種方式寄送標本
>> 組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后加冰袋運輸；
>> 細胞樣本也可以直接快件寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染，培養(yǎng)液不漏出，細胞不要長得太滿，50%左右，灌滿培養(yǎng)液)；
>> 血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保證液體不漏出，視路途遠近2-3天可到達)。
| 送檢與交付標準
| 樣品類型 | 樣品需求 | 運輸條件 |
| 組織 | 離體后組織制成單細胞懸液，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
| 活細胞 | 樣本量：1*106個細胞/TEST，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
| 血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運輸 |
